Токсикология и масс-спектрометрия

В XXI веке масс-спектрометрия стала незаменимым инструментом фундаментальных и прикладных исследований в области химии, экологии, токсикологии, медицины и т.д. Современная масс-спектрометрия позволяет работать не только с классическими объектами окружающей среды: вода, воздух, почва, но и анализировать сложные биологические соединения в самых разных матрицах.

В последние годы были сделаны значительные открытия в масс-спектрометрии (МС) и усовершенствована материально-техническая база. Несмотря на это, пробоподготовка к МС развивается значительно медленнее. Подготовка образца стала серьезной проблемой, и вопросы, связанные с ручной обработкой, препятствуют внедрению МС в науке и клинике. Компания Tecan предлагает готовые решения для автоматизации процесса пробоподготовки даже для самых сложных протоколов МС с помощью платформы Freedom EVO®.

Преимущества решений TECAN для пробоподготовки к масс-спектрометрии:

• увеличение производительности лаборатории;
• автоматизированное чтение штрих-кодов и четкое отслеживание образца;
• подключение к LIMS для удовлетворения самых жестких требований качества;
• интуитивно понятное и гибкое программное обеспечение Freedom EVOware® для самых сложных протоколов;
• безопасность для оператора, информации и образцов.

Freedom EVO является гибкой платформой, которая может меняться и расти вместе с изменениями Ваших потребностей.

Решения

• ТВЕРДОФАЗНАЯ ЭКСТРАКЦИЯ (SPE)

  Несмотря на широкое применение твердофазной экстракции для очистки образцов перед проведением жидкостной хромато-масс-спектрометрии (ЖХ-МС), пробоподготовка к ней является громоздкой и трудоемкой. Автоматизированная SPE с рабочей станцией Freedom EVO® решает эту проблему, позволяя Вам сосредоточиться на более важных вопросах.

  Характеристика системы:
  Платформа Freedom EVO® 100 с 8-канальным пипетирующим манипулятором, переносящим манипулятором, вакуумным модулем, термошейкером и сканером штрих-кодов.

  • Гибкость: одноразовые или моющиеся фиксированные наконечники, пипетирующий манипулятор с воздушной или жидкостной системой – выбор за Вами.
  • Производительность: возможность осуществлять экстракцию в 96-луночном формате. Независимые движения манипуляторов позволяют увеличить скорость обработки образцов.
  • Качество: встроенные функции безопасности отвечают самым строгим требованиям к качеству.

  Экстракционный планшет

  Лаборатории все чаще используют жидкостную хроматографию в сочетании с масс-спектрометрией (ЖХ-МС) в качестве рутинной методики количественного определения низкомолекулярных молекул. Анализу биологического образца методом ЖХ-МС препятствуют матричные компоненты, такие как белки и фосфолипиды. Существующие методы удаления этих веществ, такие как твердофазная экстракция (SPE), жидкостная экстракция (LLE) и осаждение белков, представляют некоторые проблемы на пути автоматизации процесса пробоподготовки. Они, как правило, требуют этапов фильтрации, испарения растворителя, и / или центрифугирования, которые трудно автоматизировать.

  Экстракционный планшет от компании Tecan с технологией TICE (Tecan Immobilized Coating Extraction) усовершенствует Вашу рутинную подготовку образца для МС. Последовательность простых этапов добавления реагентов и перемешивания, без фильтрации, центрифугирования или испарения растворителя - это все, что требуется. Экстракционный планшет легко интегрируется в автоматизированные процессы, что делает его идеальным решением для МС в сочетании с платформой Freedom EVO.

  Экстракционный планшет является глубоколуночным микропланшетом на 96 образцов. Каждая лунка покрыта специальным твердым носителем TICE. Он представляет собой сорбент с высокой поглощающей способностью конкретных низкомолекулярных аналитов из водных растворов, освобождая их при контакте с подходящей органической фазой.

  

  Процедура подготовки образца с использованием экстракционного планшета:

  • Считывание штрих-кодов образцов
  • Внесение образцов в экстракционный планшет
  • Перемешивание (аналит поглощается сорбентом из водной фазы)
  • Промывка (удаление белков, фосфолипидов, соли и других нежелательных молекул)
  • Элюирование аналита подходящим органическим растворителем
  • Внесение элюата в виалы для ЖХ-МС

  Элюат не требует никакой дальнейшей обработки, и может быть непосредственно введен в систему ЖХ-МС для анализа.

  Экстракционный планшет является универсальным инструментом, который можно использовать для извлечения различных типов аналитов из водных матриц. Как правило, аналиты, предназначенные для извлечения, должны иметь следующие характеристики:

  • Полярность - Log P вл должна быть выше 2,5
  • Размер - молекулярная масса должна быть не ниже 1200 Da

  Витамин D

  Экстракция витамина D2/D3 из сыворотки и плазмы крови была подробно исследована с помощью экстракционного планшета. Исследования были проведены как вручную, так и на автоматизированной платформе Freedom EVO® и результаты можно найти в разделе технической литературы. Другие типичные аналиты, которые могут быть извлечены с помощью экстракционного планшета, - стероидные гормоны, иммунодепрессанты и другие малые молекулы из любых биологических жидкостей.

  Технические характеристики экстракционного планшета

  Технические данные
  Наименование	Экстракционный планшет, 96 лунок, с TICE покрытием, 1 планшет в упаковке
  Количество тестов	96
  Максимальный объем жидкости	500 мкл
  Химическая стойкость	Совместимые растворители: метанол, ацетонитрил, этанол, изопропанол, 2% уксусной кислоты, 2% муравьиной кислоты, 2% гидроксид аммония, ацетат аммония. Несовместимые растворители: ароматические углеводороды, сложные эфиры, кетоны и концентрированные кислоты. В случае сомнения, обратитесь к специалисту по оборудованию Tecan.
  Режим эксплуатации	Диапазон температур от 15° С до 32° С. Относительная влажность при эксплуатации должна быть от 30% до 80% (без конденсации).
  Хранение	15°С до 32°С. Упаковка должна храниться в сухом и защищенном от прямых солнечных лучей месте.
  Диапазон рН	Водные растворы с рН в диапазоне от 2 до 10.
  Срок годности	До 6 месяцев с даты изготовления при условии надлежащего хранения (15°C до 32°C).
  Размеры	127.8мм х 85.5мм х 27.1мм

• ЖИДКОСТНАЯ ЭКСТРАКЦИЯ (LLE)

  Tecan Freedom EVO® (LLE) - рабочая станция для жидкостной экстракции, которая создает гибкое и надежное решение для очистки различных химических веществ.

  С такими возможностями, как полное разделение фаз, центрифугирование, и пипетирование непосредственно в виалы ЖХ-МС для инъекций, Вы сможете проводить самые сложные экстракции растворителем.

  Характеристика системы:
  Платформа Freedom EVO 100 с 8-канальным пипетирующим манипулятором, переносящим манипулятором, штативами для реагентов, интегрированной в станцию центрифугой, термошейкером и сканером штрих-кодов.

  • Безопасность: автоматизация снижает время контакта оператора с органическими растворителями.
  • Надежность: высокая точность позволяет получить достоверные результаты независимо от оператора и внешних условий.
  • Снижение затрат: экономичное использование дорогостоящих растворителей.

  Этапы проведения жидкостной экстракции

  • Считывание штрих-кодов образцов
  • Внесение образцов в экстракционные виалы
  • Добавление органической фазы
  • Перемешивание (аналит поглощается растворителем из водной фазы)
  • Центрифугирование
  • Отбор органической фазы
  • Внесение органической фазы в виалы для ЖХ-МС
• ПРОТЕОМНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

  Сегодня в мире наблюдается растущий интерес фармацевтической промышленности к разработке биопрепаратов и их научным исследованиям. Компания Tecan предлагает решение на базе станции Freedom EVO® для выделения белков из геля, позволяя получать максимальный выход восстановленных пептидов.

  Характеристики системы:
  Платформа Freedom EVO 100 с 8-канальным пипетирующим манипулятором, переносящим манипулятором, штативами для реагентов (в т. ч. нагреваемыми и охлаждаемыми), модулем вакуумной фильтрации, термошейкером, сканером штрих-кодов.

  • Предотвращение загрязнения: минимизация вероятности загрязнения образцов благодаря покрытому силиконом лабораторному оборудованию и уникальной закрытой гель-разрушающей системе.
  • Надежность: Вы будете получать наилучшие результаты каждый раз.
  • Автоматизация всех этапов выделения: восстановление, алкилирование, обработка трипсином, экстракция, нанесение на мишень MALDI
  • Высокая производительность: система позволяет обрабатывать до 192 образцов в день
  • Свободно конфигурируемая станция: различные комбинации специальных модулей позволят Вам реализовать нескольких протоколов на одной платформе.

  

  Решения для аффинной очистки белков

  

  Компания Tecan совместно с PhyNexus разработали решение для автоматизации очистки белков на колонках. Используются колонки PhyTip, содержащие сорбенты с Protein G. Платформа Freedom EVO оснащена многоканальным манипулятором MCA96 для параллельной хроматографии 96 образцов. Элюция в объеме от 10 мкл позволит максимально сконцентрировать образцы.
  Сайт: http://phynexus.com/

  

  Компании Tecan и Atoll успешно интегрировали RoboColumn - 96-колоночную систему в роботизированную станцию, позволяющую провести скрининг различных параметров аффинной очистки белков. Программа позволяет провести подготовку буфера, уравновешивание колонок, ввод пробы, элюирование, сбор элюата и регенерацию колонок.

  Стабильность: рН 1 - 14, органические растворители, минеральные и органические соли, обычные элюенты и добавки (мочевина, антиоксиданты, тиолы, детергенты).
  Рабочий объем 50, 100, 200 и 600 мкл.
  Сайт: http://www.atoll-bio.com/